ชุดทดสอบ MTB/MDR (Sanity 2.0) (ตัวย่อ: Sanity-2 MTB/MDR) เป็นชุดทดสอบแบบตลับสำหรับการตรวจหาเชิงคุณภาพสำหรับเชื้อ Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) และการกลายพันธุ์ที่ดื้อต่อยาหลายขนาน (รวมถึงการกลายพันธุ์ที่ดื้อต่อยา rifampin และไอโซไนอะซิด) - การกลายพันธุ์ที่ต้านทาน) ในเชื้อวัณโรค(MTB) จากตัวอย่างเสมหะชุดอุปกรณ์นี้ออกแบบมาเพื่อทำงานบน Sanity 2.0 ซึ่งรวมเอาการสกัดกรดนิวคลีอิก ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสแบบเรียลไทม์ (rt-PCR) การวิเคราะห์กราฟการหลอมเหลว และการตีความผลลัพธ์ไว้ในเครื่องมืออัตโนมัติเต็มรูปแบบ (เครื่องออลอินวัน)

หลักการ

Sanity-2 MTB/MDR ใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสแบบเรียลไทม์ (rt-PCR) ที่ใช้โพรบ Taqman เพื่อตรวจจับยีน IS6110 ในเชิงคุณภาพที่มีความจำเพาะสำหรับ MTBC รวมถึงการควบคุมภายในที่ไม่ใช่ของมนุษย์ (ยีน Arabidopsis thaliana SUC2)

ในเวลาเดียวกัน Sanity-2 MTB/MDR ใช้โพรบที่มีป้ายกำกับคู่เพื่อกำหนดเป้าหมายแอมปลิคอนแบบเกลียวเดี่ยวส่วนเกินที่สร้างโดย PCR แบบอสมมาตรจากนั้นใช้การวิเคราะห์เส้นโค้งการหลอมเหลวเพื่อสร้างอนุพันธ์ลบของความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์เทียบกับอุณหภูมิ และเปรียบเทียบอุณหภูมิหลอมเหลว (Tm) เพื่อให้ได้ข้อมูลการกลายพันธุ์ของลำดับโดยที่ ลำดับเป้าหมายและโพรบที่ตรงกันอย่างสมบูรณ์แบบจะให้ Tm สูงสุดความไม่ตรงกันบางส่วน เช่น การกลายพันธุ์ของจุด การแทรกหรือการลบ จะทำให้ Tm ลดลงมากกว่าการจับคู่ที่สมบูรณ์แบบระดับที่ลดลงนั้นสัมพันธ์กับประเภทของการกลายพันธุ์ของจุด จำนวนฐานของการแทรกหรือการลบ รวมถึงตำแหน่งของการกลายพันธุ์Sanity-2 MTB/MDR ครอบคลุมการกลายพันธุ์ของ rpoB (codons 507~533) เพื่อกำหนดความต้านทานของ rifampinการกลายพันธุ์ของภูมิภาคโปรโมเตอร์ ahpC (ตำแหน่ง -44~-30 และ -15~4), ภูมิภาคโปรโมเตอร์ inhA (ตำแหน่ง -17~-8) และ katG codon 315 เพื่อตรวจสอบความต้านทานของ isoniazid

เครื่องหมาย CE-IVD