O kit de identificação de micobactérias (Sanity 2.0) (abreviatura: Sanity Myco) é um kit de teste baseado em cartucho para identificar 19 micobactérias clinicamente relevantes em amostras de escarro, incluindo:
Este kit foi projetado para funcionar no Sanity 2.0, que integra extração de ácido nucleico, reação em cadeia da polimerase em tempo real (rt-PCR), análise da curva de fusão e interpretação dos resultados em um instrumento totalmente automático (máquina tudo-em-um).
Princípio
O Sanity Myco emprega sondas duplamente marcadas para atingir o excesso de amplicons de fita simples gerados por PCR assimétrica;em seguida, usa a análise da curva de fusão para gerar a derivada negativa da intensidade de fluorescência versus temperatura e de acordo com a temperatura de fusão específica (Tm) para obter as informações da sequência.No caso da presença de um alvo específico, surgirá um pico de fusão numa posição correspondente e o valor de Tm associar-se-á a uma micobactéria específica.Além disso, um fragmento do gene simportador de sacarose-próton 2 (SUC2) de Arabidopsis thaliana foi incluído como controle positivo interno (IPC) para indicação de inibição de PCR.
Marcação CE-IVD
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