O kit de teste MTB/RIF (MMCA) é um reagente de diagnóstico in vitro usado para detecção qualitativa de mutações de resistência à rifampicina (RIF) em Mycobacterium tuberculosis a partir de amostras cultivadas de Mycobacterium tuberculosis ou amostras de escarro.O kit emprega métodos de PCR e análise de curva de fusão e cobre as mutações do gene rpoB (códons 507 ~ 533) para determinar a resistência da rifampicina.
Princípio
O kit de teste MTB/RIF (MMCA) emprega sondas duplamente marcadas para atingir o excesso de amplicons de fita simples gerados por PCR assimétrica;em seguida, usa a análise da curva de fusão para gerar a derivada negativa da intensidade de fluorescência versus temperatura e compara a temperatura de fusão (Tm) para obter informações de mutação das sequências.Onde, a combinação perfeita da sequência alvo e da sonda dá o Tm mais alto;parcialmente incompatíveis, por exemplo, mutação pontual, inserção ou deleção, causariam Tm menor do que a combinação perfeita.O grau diminuído está relacionado ao tipo de mutação pontual, número base de inserção ou deleção, bem como à localização da mutação.
Marcação CE-IVD
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