O kit de teste MDR-TB (Sanity 2.0) (abreviatura: Sanity MDR-TB) é um kit de teste baseado em cartucho para detectar
mutações de resistência a múltiplos medicamentos (incluindo mutações resistentes à rifampicina e mutações resistentes à isoniazida) em Mycobacterium tuberculosis (MTB) de amostras de escarro.Este kit foi projetado para funcionar no Sanity 2.0, que integra extração de ácido nucleico, reação em cadeia da polimerase em tempo real (rt-PCR) e interpretação dos resultados em um instrumento totalmente automático (máquina multifuncional).

Princípio

O Sanity MDR-TB emprega sondas duplamente marcadas para atingir o excesso de amplicons de fita simples gerados por PCR assimétrica;em seguida, usa a análise da curva de fusão para gerar a derivada negativa da intensidade de fluorescência versus temperatura e compara a temperatura de fusão (Tm) para obter informações de mutação das sequências.Onde, a combinação perfeita da sequência alvo e da sonda dá o Tm mais alto;parcialmente incompatíveis, por exemplo, mutação pontual, inserção ou deleção, causariam Tm menor do que a combinação perfeita.O grau diminuído está relacionado ao tipo de mutação pontual, número base de inserção ou deleção, bem como à localização da mutação.Sanity MDR-TB cobre as mutações de rpoB (códons 507 ~ 533) para determinar a resistência da rifampicina;as mutações da região promotora ahpC (posições -44~-30 e -15~4), promotor inhA
região (posições -17~-8) e códon katG 315, para determinar a resistência da isoniazida.

Marcação CE-IVD