O MDR-TB Test Kit (MMCA) (abreviatura: MDR-TB Test Kit) é um reagente de diagnóstico in vitro usado para detecção qualitativa de mutações de resistência a múltiplos medicamentos (mutações resistentes à rifampicina e mutações resistentes à isoniazida) em Mycobacterium tuberculosis de cultura de Mycobacterium amostras de tuberculose ou amostras de escarro.O kit emprega métodos de PCR e análise de curva de fusão multicolorida (MMCA) e tem como alvo as mutações de rpoB (códons 507 ~ 533) para determinar a resistência da rifampicina;as mutações da região promotora ahpC (posições -44~-30 e -15~4), região promotora inhA (posições -17~-8) e códon katG 315, para determinar a resistência da isoniazida.

Princípio

O kit de teste MDR-TB emprega sondas duplamente marcadas para atingir o excesso de amplicons de fita simples gerados por PCR assimétrica;em seguida, usa a análise da curva de fusão para gerar a derivada negativa da intensidade de fluorescência versus temperatura e compara a temperatura de fusão (Tm) para obter informações de mutação das sequências.Onde, a combinação perfeita da sequência alvo e da sonda dá o Tm mais alto;parcialmente incompatíveis, por exemplo, mutação pontual, inserção ou deleção, causariam Tm menor do que a combinação perfeita.O grau diminuído está relacionado ao tipo de mutação pontual, número base de inserção ou deleção, bem como à localização da mutação.

Marcação CE-IVD