Le kit de test MTB/RIF (MMCA) est un réactif de diagnostic in vitro utilisé pour la détection qualitative des mutations de résistance à la rifampicine (RIF) chez Mycobacterium tuberculosis à partir d'échantillons de culture de Mycobacterium tuberculosis ou d'échantillons d'expectorations.Le kit utilise des méthodes d'analyse PCR et de courbe de fusion et couvre les mutations du gène rpoB (codons 507 ~ 533) pour déterminer la résistance à la rifampicine.

Principe

Le kit de test MTB/RIF (MMCA) utilise des sondes doublement marquées pour cibler les amplicons simple brin en excès générés par PCR asymétrique ;utilise ensuite l'analyse de la courbe de fusion pour générer la dérivée négative de l'intensité de fluorescence par rapport à la température, et compare la température de fusion (Tm) pour obtenir des informations sur les mutations des séquences.Où, la correspondance parfaite entre la séquence cible et la sonde donne la Tm la plus élevée ;une mésappariement partiel, par exemple une mutation ponctuelle, une insertion ou une délétion, entraînerait une diminution de la Tm par rapport à celle d'une correspondance parfaite.La diminution du degré est liée au type de mutation ponctuelle, au numéro de base d'insertion ou de délétion ainsi qu'à l'emplacement de la mutation.

Marqué CE-IVD