Le kit de test MTB/MDR (Sanity 2.0) (abréviation : Sanity-2 MTB/MDR) est un kit de test en cartouche pour la détection qualitative du complexe Mycobacterium tuberculosis (MTBC) et des mutations multirésistantes (y compris les mutations résistantes à la rifampicine et à l'isoniazide). -mutations résistantes) dansMycobacterium tuberculosis(MTB) à partir d’échantillons d’expectorations.Ce kit est conçu pour fonctionner sur Sanity 2.0, qui intègre l'extraction d'acide nucléique, la réaction en chaîne par polymérase en temps réel (rt-PCR), l'analyse de la courbe de fusion et l'interprétation des résultats dans un instrument entièrement automatique (machine tout-en-un).

Principe

Le Sanity-2 MTB/MDR utilise la réaction en chaîne par polymérase en temps réel (rt-PCR) basée sur la sonde Taqman pour détecter qualitativement le gène IS6110 spécifique du MTBC ainsi qu'un contrôle interne non humain (gène Arabidopsis thaliana SUC2).

Dans le même temps, le Sanity-2 MTB/MDR utilise des sondes doublement marquées pour cibler les amplicons simple brin en excès générés par PCR asymétrique ;utilise ensuite l'analyse de la courbe de fusion pour générer la dérivée négative de l'intensité de fluorescence par rapport à la température, et compare la température de fusion (Tm) pour obtenir des informations sur les mutations des séquences.Où, la correspondance parfaite entre la séquence cible et la sonde donne la Tm la plus élevée ;une mésappariement partiel, par exemple une mutation ponctuelle, une insertion ou une délétion, entraînerait une diminution de la Tm par rapport à celle d'une correspondance parfaite.La diminution du degré est liée au type de mutation ponctuelle, au numéro de base d'insertion ou de délétion ainsi qu'à l'emplacement de la mutation.Le Sanity-2 MTB/MDR couvre les mutations de rpoB (codons 507~533) pour déterminer la résistance à la rifampicine ;les mutations de la région promotrice ahpC (positions -44~-30 et -15~4), de la région promotrice inhA (positions -17~-8) et du codon katG 315, pour déterminer la résistance à l'isoniazide.

Marqué CE-IVD