Le kit de test MDR-TB (Sanity 2.0) (abréviation : Sanity MDR-TB) est un kit de test en cartouche pour détecter
mutations multirésistantes (y compris les mutations résistantes à la rifampicine et les mutations résistantes à l'isoniazide) chez Mycobacterium tuberculosis (MTB) à partir d'échantillons d'expectorations.Ce kit est conçu pour fonctionner sur Sanity 2.0, qui intègre l'extraction d'acide nucléique, la réaction en chaîne par polymérase en temps réel (rt-PCR) et l'interprétation des résultats dans un instrument entièrement automatique (machine tout-en-un).

Principe

Le Sanity MDR-TB utilise des sondes doublement marquées pour cibler les amplicons simple brin en excès générés par PCR asymétrique ;utilise ensuite l'analyse de la courbe de fusion pour générer la dérivée négative de l'intensité de fluorescence par rapport à la température, et compare la température de fusion (Tm) pour obtenir des informations sur les mutations des séquences.Où, la correspondance parfaite entre la séquence cible et la sonde donne la Tm la plus élevée ;une mésappariement partiel, par exemple une mutation ponctuelle, une insertion ou une délétion, entraînerait une diminution de la Tm par rapport à celle d'une correspondance parfaite.La diminution du degré est liée au type de mutation ponctuelle, au numéro de base d'insertion ou de délétion ainsi qu'à l'emplacement de la mutation.Sanity MDR-TB couvre les mutations de rpoB (codons 507~533) pour déterminer la résistance à la rifampicine ;les mutations de la région promotrice ahpC (positions -44~-30 et -15~4), promoteur inhA
région (positions -17 ~ -8) et le codon katG 315, pour déterminer la résistance à l'isoniazide.

Marqué CE-IVD