El kit de prueba MTB/MDR (Sanity 2.0) (abreviatura: Sanity-2 MTB/MDR) es un kit de prueba basado en cartuchos para la detección cualitativa del complejo Mycobacterium tuberculosis (MTBC) y mutaciones de resistencia a múltiples fármacos (incluidas las mutaciones resistentes a la rifampicina y la isoniazida). -mutaciones resistentes) enTuberculosis micobacteriana(MTB) a partir de muestras de esputo.Este kit está diseñado para funcionar con Sanity 2.0, que integra la extracción de ácido nucleico, la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (rt-PCR), el análisis de la curva de fusión y la interpretación de los resultados en un instrumento totalmente automático (máquina todo en uno).

Principio

Sanity-2 MTB/MDR utiliza la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (rt-PCR) basada en sonda Taqman para detectar cualitativamente el gen IS6110 que es específico para MTBC, así como un control interno no humano (gen SUC2 de Arabidopsis thaliana).

Al mismo tiempo, Sanity-2 MTB/MDR emplea sondas doblemente marcadas para apuntar al exceso de amplicones monocatenarios generados por la PCR asimétrica;luego utiliza el análisis de la curva de fusión para generar la derivada negativa de la intensidad de fluorescencia versus la temperatura, y compara la temperatura de fusión (Tm) para obtener información sobre la mutación de las secuencias.Donde la coincidencia perfecta de la secuencia diana y la sonda proporciona la Tm más alta;La falta de coincidencia parcial, por ejemplo, mutación puntual, inserción o eliminación, causaría una Tm menor que la de la coincidencia perfecta.El grado disminuido está relacionado con el tipo de mutación puntual, el número de base de inserción o eliminación, así como con la ubicación de la mutación.El Sanity-2 MTB/MDR cubre las mutaciones de rpoB (codones 507~533) para determinar la resistencia a la rifampicina;las mutaciones de la región promotora ahpC (posiciones -44~-30 y -15~4), la región promotora inhA (posiciones -17~-8) y el codón 315 katG, para determinar la resistencia a la isoniazida.

Marcado CE-IVD