مجموعة اختبار MTB/MDR (Sanity 2.0) (اختصار: Sanity-2 MTB/MDR) عبارة عن مجموعة اختبار قائمة على خرطوشة للكشف النوعي عن مجمع المتفطرة السلية (MTBC) والطفرات المقاومة للأدوية المتعددة (بما في ذلك الطفرات المقاومة للريفامبين والإيزونيازيد) - الطفرات المقاومة) فيالسل الفطري(MTB) من عينات البلغم.تم تصميم هذه المجموعة لتعمل على Sanity 2.0، الذي يدمج استخراج الحمض النووي، وتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (rt-PCR)، وتحليل منحنى الانصهار وتفسير النتائج في أداة أوتوماتيكية بالكامل (جهاز الكل في واحد).

مبدأ

يستخدم Sanity-2 MTB/MDR تفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الحقيقي القائم على مسبار Taqman (rt-PCR) للكشف النوعي عن جين IS6110 الخاص بـ MTBC بالإضافة إلى التحكم الداخلي غير البشري (جين Arabidopsis thaliana SUC2).

في الوقت نفسه، يستخدم Sanity-2 MTB/MDR تحقيقات ذات علامات مزدوجة لاستهداف الأمبليكونات المفردة الزائدة الناتجة عن تفاعل البوليميراز المتسلسل غير المتماثل؛ثم يستخدم تحليل منحنى الانصهار لتوليد المشتق الناقص لكثافة الفلورسنت مقابل درجة الحرارة، ويقارن درجة حرارة الانصهار (Tm) للحصول على معلومات طفرة للتسلسلات.حيث أن التطابق التام بين تسلسل الهدف والمسبار يعطي أعلى Tm؛قد يؤدي عدم التطابق الجزئي، على سبيل المثال، طفرة النقطة أو الإدراج أو الحذف، إلى انخفاض Tm مقارنة بالتطابق التام.ترتبط الدرجة المنخفضة بنوع طفرة النقطة والرقم الأساسي للإدراج أو الحذف بالإضافة إلى موقع الطفرة.يغطي Sanity-2 MTB/MDR طفرات rpoB (الكودونات 507~533) لتحديد مقاومة الريفامبين؛طفرات منطقة المروج ahpC (المواضع -44 ~ -30 و-15 ~ 4)، ومنطقة المروج inhA (المواضع -17 ~ -8)، وكودون katG 315، لتحديد مقاومة الأيزونيازيد.

علامة CE-IVD